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      Omega Analyzer結合UPLC/QTof推出復雜體系中脂質成分鑒定及C=C雙鍵精準定位解決方案

      清譜科技發布時間:2020/06/11 10:31 點擊: 加載中..

      ? ? 脂質精細結構的鑒定是目前脂質相關分析化學和生命科學的研究熱點之一,是進一步研究脂質異構體生理過程及功能的基礎。近期,清譜科技與沃特世科技(Waters)合作,將清譜科技的Ω Analyzer(脂質分析系統)結合Waters UPLC/QTof系統,實現了脂質碳碳雙鍵(C=C)異構體的分析,并推出了快速、高效的復雜生物脂質精準分析解決方案。Waters已發布Application Notes (點擊此處查看完整內容)。


      【流程及分析原理】

      ? ? 該解決方案以牛肝提取物中的磷脂類成分(腦磷脂、卵磷脂及鞘磷脂)分析為例,詮釋了其快速鑒定工作流程,利用3針進樣快速解析復雜生物樣品中磷脂分子結構信息。

      微信圖片_20200610151825.png

      ? ? 該方案具體通過UPLC(HILIC)快速分離不同類別脂質,然后在線進入Ω Analyzer進行PB光化學衍生反應,最后通過QTof質譜儀進行檢測,不僅可以快速獲得不同脂質分子中脂肪?;?烷基鏈信息,還可以獲得脂鏈上C=C雙鍵的數量及位置位置信息。結合數據分析系統和軟件平臺可自動進行數據采集、數據處理分析,可快速得到大量脂質的分析結果。
      ? ? 案例中具體闡述了如何利用清譜科技Ω Analyzer(脂質分析系統)+UPLC/QTof鑒定腦磷脂PE16:0_18:1(Δ9)的分析流程。此外,該方法也適用于多不飽和磷脂異構體的分析,下圖所示為PE18:0_20:4(Δ 5, 8, 11, 14)和PE16:0_22:4(Δ 7, 10, 13, 16)雙鍵位置異構鑒定示例。

      微信圖片_20200610152226.png



      【總結】

      ? ? 清譜科技的Ω Analyzer(脂質分析系統)結合Waters UPLC/QTof的全新組合方式,實現脂質C=C位置的精準分析及相對定量,使快速分析復雜樣品中脂質成分成為可能,將為脂質異構體生物學研究提供高效易用的新工具。



      點擊鏈接查看完整內容:

      https://www.waters.com/waters/library.htm?lid=135067295&locale=122



      Ω Analyzer相關技術延伸:

      ? ? 清華大學瑕瑜、歐陽證教授課題組此前發展了基于Paternò-Büchi光衍生-串聯質譜的脂質碳碳雙鍵(C=C)異構體分析技術,將脂質結構解析與定量推向更深水平,已成為脂質結構鑒定和脂質組分析的主流技術之一。該技術可準確表征脂質C=C異構體,與鳥槍脂質組分析(shotgun lipidomics)[1]和小型質譜儀聯用,實現人癌組織中脂質C=C異構體的結構表征和相對定量分析[2]。2019年,課題組通過發展光化學微流反應器,實現了光化學PB衍生與液相色譜-串聯質譜(HPLC-MS/MS)的在線聯用。發展了不飽和磷脂高通量分析質譜平臺,提高低豐度脂質的分析靈敏度及脂類物質覆蓋度,并探究了C=C雙鍵位置異構體在新型疾病標志物發現中的可能性。該研究成果發表于Nature Communications(2019)[3]。以該反應器和相關數據分析方法為基礎,開發了Ω Analyzer脂質分析系統。
      ? ? 近期,瑕瑜教授課題組基于新型氣相自由基碎裂反應,利用碳酸氫根與膽堿磷酸之間的非共價相互作用,利用碰撞誘導裂解將C-N均裂,實現了膽堿磷脂脂肪酸鏈sn位置異構體的結構鑒定與定量。該方法與Ω Analyzer聯用,實現了膽堿磷脂中脂肪酸鏈sn位置及C=C位置的同時、準確結構鑒定。該研究成果發表于Chemical Science(2019)[4]。由于流動相的兼容問題,PB反應與反向液相色譜(RPLC)的在線結合存在一定困難。針對該問題,最近,瑕瑜教授課題組發展了新的脂質RPLC分離分析流動相?;诒?、乙腈和水體系下發展的梯度洗脫流程,在較低柱溫下即可實現大量生物脂質混合物的高效RPLC分離。相關色譜分離方法與Ω Analyzer聯用,建立了RPLC-PB-MS/MS在線分析技術,顯著提升了PB方法在生物樣品中磷脂異構體分析上的性能。該研究成果發表于Analytical Chemistry(2020)[5]。


      參考文獻:

      [1] Ma X, Chong L, Tian R, et al. Identification and quantitation of lipid C=C location isomers: A shotgun lipidomics approach enabled by photochemical reaction[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2016, 113(10):2573.
      [2] Zou R, Cao W, Chong L, et. al. Point-of-Care Tissue Analysis Using Miniature Mass Spectrometer[J]. Analytical Chemistry, 2019, 91(1): 1157-1163.
      [3] Zhang W, Zhang D, Chen Q, et al. Online photochemical derivatization enables comprehensive mass spectrometric analysis of unsaturated phospholipid isomers[J]. Nature communications, 2019, 10(1): 79.
      [4]? Zhao X, Zhang W, Zhang D, Liu X, Cao W, Chen Q, Ouyang Z, Xia Y. A lipidomic workflow capable of resolving sn- and C=C location isomers of phosphatidylcholines. Chemical Science 2019, 10: 10740-0748.
      [5] Zhang W, Shang B, Ouyang Z, Xia Y. Enhanced phospholipid isomer analysis by online photochemical derivatization and RPLC-MS. Analytical Chemistry 2020, 92:6719-6726.


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